Sequenzierung der nächsten Generation (NGS)
Die Sequenzierung der nächsten Generation (NGS), auch bekannt als Hochdurchsatz-Sequenzierung, ist ein Sammelbegriff, der eine Reihe verschiedener moderner Sequenzierungstechnologien beschreibt, darunter:
- Illumina® (Solexa) Sequenzierung
- Roche 454-Sequenzierung
- Ion torrent: Proton / PGM-Sequenzierung
- SOLiD-Sequenzierung
Diese neuen Technologien ermöglichen es uns, DNA und RNA viel schneller und kostengünstiger zu sequenzieren als die früher verwendete Sanger-Sequenzierung, und haben somit das Studium der Genomik und Molekularbiologie revolutioniert
Die Methoden der DNA-Sequenzierung der nächsten Generation umfassen drei allgemeine Schritte:
- Bibliotheksvorbereitung: Die Bibliotheken werden durch zufällige Fragmentierung der DNA erstellt, gefolgt von einer Ligation mit speziellen Linkern.
- Amplifikation: Die Bibliothek wird mit klonalen Amplifikationsmethoden und PCR amplifiziert.
- Sequenzierung: Die DNA wird mit einem von mehreren verschiedenen Ansätzen sequenziert
Die Next-Generation-Sequencing (NGS)-Technologie von Illumina® nutzt die klonale Amplifikation und die Sequenzierung durch Synthese (SBS)-Chemie, um eine schnelle und genaue Sequenzierung zu ermöglichen. Das Verfahren identifiziert gleichzeitig DNA-Basen und baut sie in eine Nukleinsäurekette ein. Jede Base gibt beim Einbau in den wachsenden Strang ein eindeutiges Fluoreszenzsignal ab, das zur Bestimmung der Reihenfolge der DNA-Sequenz verwendet wird.
Mit der NGS-Technologie kann die DNA eines beliebigen Organismus sequenziert werden, was wertvolle Informationen zu fast allen biologischen Fragestellungen liefert. Als hochgradig skalierbare Technologie kann die DNA-Sequenzierung auf kleine, gezielte Regionen oder das gesamte Genom mit einer Vielzahl von Methoden angewandt werden, was es den Forschern ermöglicht, Gesundheit und Krankheit zu untersuchen und besser zu verstehen.
Mit der NGS-Technologie kann die DNA eines beliebigen Organismus sequenziert werden, was wertvolle Informationen zu fast allen biologischen Fragestellungen liefert. Als hochgradig skalierbare Technologie kann die DNA-Sequenzierung auf kleine, gezielte Regionen oder das gesamte Genom mit einer Vielzahl von Methoden angewandt werden, was es den Forschern ermöglicht, Gesundheit und Krankheit zu untersuchen und besser zu verstehen.