Der Hexokinase-Aktivitätsassay ist eine entscheidende biochemische Technik, die verwendet wird, um die Aktivität der Hexokinase zu messen, einem Enzym, das die Phosphorylierung von Glukose zu Glukose-6-phosphat katalysiert, einem Schlüsselprozess in der Glykolyse.

Dieser Assay verwendet typischerweise eine gekoppelte enzymatische Reaktion, die die Glukose-6-phosphat-Dehydrogenase (G6PDH) und das Coenzym NAD+ umfasst. Der Prozess beginnt mit der Umwandlung von Glukose zu Glukose-6-phosphat durch Hexokinase, wobei gleichzeitig ATP zu ADP umgewandelt wird. Das produzierte Glukose-6-phosphat wird dann von G6PDH oxidiert, was zu einer Reduktion von NAD+ zu NADH führt. Der Anstieg von NADH kann quantitativ spektrophotometrisch bei 340 nm gemessen werden, was eine direkte Bewertung der Hexokinase-Aktivität ermöglicht.

Der Assay ist empfindlich und kann an verschiedenen Probenarten durchgeführt werden, einschließlich Gewebshomogenaten und Zellextrakten, wodurch er sowohl für klinische Diagnosen als auch für Forschungsanwendungen von Wert ist. Er ist besonders nützlich in Studien zu Stoffwechselerkrankungen, Krebsstoffwechsel und den Auswirkungen von Arzneimitteln auf glykolytische Wege. Durch die Messung der Hexokinase-Aktivität können Forscher Einblicke in den zellulären Energiestoffwechsel und die regulatorischen Mechanismen gewinnen, die die Glykolyse steuern, und so zu einem besseren Verständnis von Stoffwechselstörungen und möglichen therapeutischen Zielen beitragen.