F(ab)-fragmentierte Sekundärantikörper
Fab- und F(ab')2-Fragmente sind zwei Arten von fragmentierten sekundären Antikörpern, die häufig in verschiedenen Anwendungen verwendet werden. Hier sind einige wichtige Punkte zu F(ab)-Fragmenten:
- F(ab)-Fragmente sind monovalente Antikörperfragmente, die nur einen antigenbindenden Fab-Teil enthalten und die Fc-Region fehlen. Sie werden durch Papainverdauung von ganzen IgG-Antikörpern erzeugt, um die Fc-Region und den gesamten Hinge-Bereich zu entfernen.
- F(ab)-Fragmente haben ein Molekulargewicht von etwa 50 kDa, was kleiner ist als bei ganzen IgG-Antikörpern und F(ab')2-Fragmenten. Dies ermöglicht eine bessere Penetration in Gewebe und reduziert die unspezifische Bindung an Fc-Rezeptoren auf lebenden Zellen oder an Protein A/G.
- F(ab)-Fragmente sind nützlich, um endogene Immunglobuline auf Zellen, Geweben oder anderen Oberflächen zu blockieren, sowie für die Blockierung der freiliegenden Immunglobuline bei Mehrfachfärbeexperimenten mit Primärantikörpern aus derselben Spezies. Sie können auch verwendet werden, um Primärantikörper vor der Inkubation mit der experimentellen Probe zu Fab-markieren.
- F(ab)-Fragmente sind monovalent und haben eine geringere Avidität als F(ab')2-Fragmenten, was ihre Sensitivität und Spezifität in bestimmten Anwendungen beeinträchtigen kann.
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