Anti-Kaninchen-Sekundärantikörper

Anti-Kaninchen Sekundär-Antikörper sind Antikörper, die verwendet werden, um die Präsenz von Primär-Antikörpern, die in Kaninchen erzeugt wurden, zu erkennen und zu visualisieren. Sie werden durch Immunisierung eines Wirbeltier-Hosts mit einer Poolpopulation von Immunoglobulinen (Ig) der Zielart, in diesem Fall Kaninchen, erzeugt und die resultierenden Antikörper werden dann gesammelt und gereinigt. Anti-Kaninchen Sekundär-Antikörper sind in Wirtsarten wie Ziegen, Esel, Mäusen, Hühnern und Schafen erhältlich und kommen in verschiedenen Konjugaten, einschließlich nicht markierter Antikörper, Enzym-Konjugaten (alkalische Phosphatase (AP) oder Horseradish Peroxidase (HRP)) und Biotin. Sie sind auch als Ganz-IgG erhältlich.

Die Wahl des richtigen Anti-Kaninchen Sekundär-Antikörpers für ein Experiment hängt von mehreren Faktoren ab, einschließlich der Anwendung, der Wirtsart des Primär-Antikörpers, des Isotyps des Sekundär-Antikörpers, des Konjugat-Typs und der Vorabsorption oder Kreuz-Absorption. Die folgenden Schritte können helfen, den richtigen Antikörper auszuwählen:

• Bestimmen Sie die Wirtsart des Primär-Antikörpers: Der Sekundär-Antikörper sollte gegen die Wirtsart gerichtet sein, die für die Herstellung des Primär-Antikörpers verwendet wurde. Zum Beispiel, wenn der Primär-Antikörper in Kaninchen hergestellt wurde, sollte ein Anti-Kaninchen Sekundär-Antikörper, der in einer anderen Art als Kaninchen, wie Ziege, Esel oder Maus, erzeugt wurde, verwendet werden.
• Bestimmen Sie den Isotyp des Primär-Antikörpers: Der Sekundär-Antikörper sollte gegen die Klasse/Isotyp des Primär-Antikörpers gerichtet sein. Zum Beispiel, wenn der Primär-Antikörper ein Maus IgG1 ist, sollte ein Anti-Maus IgG oder ein weniger spezifisches F(ab)-Fragment Anti-Maus IgG verwendet werden.
• Wählen Sie den Konjugat-Typ: Sekundär-Antikörper können Enzym-markiert (Peroxidase, alkalische Phosphatase), Fluorochrom-markiert (FITC, R-PE, Alexa-Fluor®) oder biotiniliert sein. Die Wahl des Konjugat-Typs hängt von der Anwendung ab.
• Berücksichtigen Sie Vorabsorption oder Kreuz-Absorption: Vorabsorption oder Kreuz-Absorption kann helfen, unspezifische Bindung zu reduzieren. Zum Beispiel, wenn der Primär-Antikörper in Kaninchen erzeugt wurde, kann ein Anti-Kaninchen Sekundär-Antikörper, der gegen andere Arten, wie Maus oder Mensch, vorab absorbiert wurde, verwendet werden.
• Überprüfen Sie die Kompatibilität mit dem Assay: Der Sekundär-Antikörper sollte mit dem verwendeten Assay kompatibel sein, wie zum Beispiel Western Blot oder Immunhistochemie.